Practica 8,9

Practica 8,9 Aglutinacion

Empezamos con nuestro equipo de bioseguridad y nos entregaron los materiales necesarios para la extracción de sangre.
Se hizo la técnica de veno punción para utilizar 2.5 ml en volumen y vaciarlo en un tubo de ensaye de tapa roja.
Le dimos el tiempo de coagulación y se metió a la centrífuga para separar el plasma y con una pipeta Pasteur con bulbo punteamos sobre la laminilla de cristal para reacciones febriles y en cada círculo de la laminilla con su gota de de plasma se le aplicó febriclin H O A B Brucella abortus y Proteus.
En la parte en la que mirábamos al microscopio se pudo observar como arenilla en la laminilla.
Para hacer la prueba de aglutinación en sangre se utiliza la que está fresca, usamos la sangre que vaciamos en el tubo con tapa morada.
Con la pipeta Pasteur se puntea una gota de sangre en 3 orificios de la placa excavada y se agrego a cada una, una gota de reactivo, se pudo observar como una gota de sangre se quebró, se agrietó las otras seguían igual.

Conclusión:
Con estas pruebas se puede determinar el tipo sanguíneo del paciente y con las reacciones febriles se puede ver determinada bacteria.

Practica 6,7 Tincion de gram

Una ves puesto el campo de esterilizacion, se nos fue entregando el frotis ya antes realizado,

ahora tubimos que colocar la preparacion fijada con la solucion de cristal violeta durante 1m,

despues lo dejamos escurrir y luego lo metemos en yodo durante 1m, despues que haya pasado

el minuto lo lavamos con algo y se mete en la otra solucion durante 30 seg, una ves echo eso lo

dejamos secar y le ponemos una gota de aceite de imercion.

y por ultimo lo observamos por el microscopio.

Practica 5 Frotis

FROTIS

Con el asa bactereologica se va a desarrollar un frotis en un portaobjetos de cristal.

Se toma el asa bactereologica se pone en la flama del mechero dejandola al rojo vivo para que se esterilize, se retira del fuego se toma una pequeña gota de agua destilada, con ella misma se extrae una muestra del material bactereologico que crecio en las cajas petri.

una vez teniendo ese material en el asa de acude a ponerlo en el portaobjetos en la parte central desplazando de izquierda a derecha el material bactereologico hasta que nos quede delgada, una vez teniendola verificamos si ya esta lista para el frotis de la muestra del cultivo.
ya realizado el frotis se fija de forma directa, se toma el porta de sus partes laterales a lo largo para su transporte.

Por ultimo, se toma el porta de forma lateral para pasarlo por la flama nunca se debe dejar de forma directa en la flama.
una vez fijado el frotis queda listo para el proceso de tincion.

Practica 4

OBSERVACION MACROSCOPICA

En esta practica observamos lo que sembramos y observamos que cambio de color y de olor para esto esperaremos de 24 hrs para ver si crece nuestra siembra

Practica 3 Siembras

Practica 3 Siembras.

El alumno debe realizar una siembra en medio de cultivo de forma estriada, variada y aplicando el nombre de cada una de las que se dieron.
Materiales:

-5 o 7 cajas petri de medio de cultivo.
-Asa bacteriologica
-Vaso de precipitado con 25ml. de agua destilada.
-2 mecheros de bunsen
-Papel para mesa de laboratorio
-Tape
-Algodon secoAlgodones con alcohol
-Tubo conico de plastico
Muestras para siembras:
-Saliva
-Muestra interdental
-Orina
-Agua preparada
-Verduras
-Muestra de sangre
Tecnica de extraccion sanguinea:
Materiales:
-Jeringa 5ml.
-Torundas de algodon alcoholosadas
-Torniquete

despues de aber entregarnos los materiales realizamos la siembra necesaria que nos toco en este caso sembranos orina el tipo de siembra que realizamos es estirada despues de aver sembrado la sellamos y pusimos nuestros datos y lo entregamos para llevarlo a la encubadora.

Practica 1,2 medios de cultivo

Practica 1
Medios de cultivo

Al entrar al laboratorio Químico nos colocamos nuestro equipo de bioseguridad , recogimos el bala de materiales y escribimos los materiales que utilizaremos para la practica y los materiales que ocupamos fueron los siguientes :

-Balanza gran ataría
-varilla de cristal
-matraz ele Mayer
-vaso de precipitado
-2 mecheros de bunsen
-embudo de Buren
-probeta graduada
-vidrio de reloj
-medio de cultivo
-7 cajas potril
-espátula
-agua destilada
-gas LP

Después de obtener dichos materiales nos pusimos a trabajar en la regla de 3 para obtener la cantidad necesaria que se ocupa en el medio de cultivo .
Después pesamos cierta cantidad de medios de cultivo para obtener la cantidad necesaria para cada caja potril la cual es 6.65 de medio de cultivo después la mezclamos con agua destilada en un baso de precipitado después de haberlo mezclado lo batimos hasta que no quedaran grumos dejamos reposar por 10 minutos y luego encendimos los mechero hasta que llegara al punto de ebullición la mezcla que hicimos se dejo reposar 5 minutos después de haberlo dejado reposar lo taconeamos con torundas de algodón y les pusimos una cinta con nuestros datos después de Haver puesto los datos se coloco en el autoclave y esperamos 15 minutos después de haberlo echo se dejo reposar a temperatura media hasta que desapareciera el vapor.

Tipos de siembra

Cultivo en medio líquido Habitualmente se realiza en tubos o en matraces. El crecimiento se puede manifestar por enturbiamiento, por formación de velo o película, o por sedimento.Cultivo en medio sólido Puede ser en tubos o placas.





a) Tubos con agar inclinado.
Para sembrarlos, se mueve el ansa o la punta suavemente sobre la superficie del agar con un movimiento en zigzag desde el fondo hasta la parte superior, cuidando de no dañar el agar.





b) Tubos sin inclinar.
Se siembran introduciendo una punta en el centro del agar. También se llama siembra por picadura.





c) Siembra en placas.
Puede ser en superficie o incorporada.

En superficie:

1) Se colocan 0.1 mL de la dilución de la muestra con pipeta estéril en el centro de la placa, y se distribuye con un rastrillo estéril.


2) Se siembra con un ansa para aislar, como se explica más adelante.


3) Se siembra con un hisopo.IncorporadaSe coloca 1 mL de la muestra en una placa estéril vacía, en el centro de la misma. Sobre ella se agregan 20 mL de medio de cultivo fundido y termostatizado a 45ºC; luego se agita la placa, moviéndola 4 veces en sentido horario, 4 en sentido antihorario, una vez de arriba a abajo, una vez hacia los costados y una vez en sentido antihorario.Las placas se incuban invertidas, ya que la alta concentración de agua en el medio puede provocar condensación durante la incubación y si cae sobre la superficie del agar, se extiende dando un crecimiento confluente.En medio sólido cada célula viable dará origen a una colonia y por lo tanto la siembra en placas se puede utilizar, no solo para cultivar microorganismos, sino además para contar y aislar.En general cuando se quieren tener colonias aisladas a partir de un material determinado, es necesario diluir la muestra en tubos con suero fisiológico estéril.

Bitacora

Bitacoras.

Bitacora de mantenimiento correctivo y preventivo.

El Mantenimiento Correctivo:Consiste en la reparación de un equipo o máquina cuando se dispone del personal, repuestos, y documentos técnicos necesario para efectuarlo.

El mantenimiento preventivo: Es un procedimiento periódico para minimizar el riesgo de fallo y asegurar la continua operación de los equipos, logrando de esta manera extender su vida útil.

Etapa Pre - Analitica Analitica y Post - Analitica

ETAPA PREANALÍTICA :
Asegura que se efectúe con calidad todo procedimiento anterior a la prueba tanto dentro como fuera del laborator


ETAPA ANALITICA:
Este paso es clave en la Planificación Estratégica porque nos va a permitir conocer cuáles son
los principales problemas con los que nos enfrentamos, y a partir de los cuales deberemos
buscar las soluciones específicas. Requiere de un análisis realista, en él se basarán luego las
estrategias con las que se intentará revertir la situación apuntando al logro de los objetivos
propuestos.


ETAPA POST-ANALITICA:
es la entrega de los resultados al paciente.

Frotis

Frotis

Un frotis de sangre es un proceso científico que consiste en el extendido de una gota de sangre en la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos, con el fin de analizarla posteriormente.

Es más adecuado emplear sangre que aun no ha estado en contacto con el anticoagulante, pues este podría alterar los resultados (algunos anticoagulantes tienden a deformar las células de la sangre).

Su realización es de vital importancia para obtener una orientación de:

1. La valoración de la estimulación eritropoyetica.
2. Las anomalías en la maduración nuclear y citoplásmica de las células hemáticas.
3. Los trastornos en la arquitectura de las células al formarse en la médula osea.
4. Las alteraciones singulares en la forma de las células, que son una identificación especifica de algunas enfermedades.
5. Algún indicador de los efectos nocivos de la quimioterapia y de la radioterapia.
6. La diferenciación y recuento de los elementos celulares de la sangre.

La fidelidad de la información obtenida de ellos, depende en gran parte de la calidad de las extensiones. Estas no deben ser demasiado gruesas porque las células se amontonarían y no podrían ser reconocidas, ni diferenciarse, ni demasiado delgadas porque las células se deformarían, distorsionarían y destruirían. Por eso los frotis de sangre deben ser bien nivelados y para obtener buenos resultados es necesario que:

1. Tanto portaobjetos como cubreobjetos deben estar bien limpios y desengrasados (prefentemente nuevos).
2. La gota de sangre usada para la preparación de el frotis no debe ser muy grande ni pequeña, de preferencia de el tamaño de la cabeza de un alfiler (entre 2 y 3 mm), obtenida por punción capilar.
3. La sangre no haya estado en contacto con anticoagulante, pues podría deformarse la morfología celular si pasase esto.
4. La lectura de las extensiones se hará en las zonas donde los eritrocitos "casi se tocan".

Investigacion 3 Tinciones

Tinción

Un especimen histológico teñido, colocado entre portaobjetos y cubreobjetos, montado sobre la platina de un microscopio de luz.

La tinción (término más común) o coloración es una técnica auxiliar en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio.

En bioquímica, esto implica agregar un colorante específico (ADN, proteínas, lípidos, carbohidratos, etc.) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto. Esto es similar al marcado fluorescente.

Las tinciones y colorantes se usan con frecuencia en biología y en medicina para destacar estructuras en tejidos biológicos para observación, a menudo con la ayuda de diferentes tipos de microscopios.

Las tinciones pueden ser usadas para definir y examinar tejidos en bruto (reslatando, por ejemplo, fibras musculares o tejido conectivo), poblaciones celulares (clasificando diferentes células sanguineas, por ejemplo) u organelos dentro de células individuales.

Tinciones biológicas son también usadas para marcar células en citometría de flujo y para marcar proteinas ó acidos nucleicos en electroforesis en gel.

Las tinciones no están limitadas a materiales biológicos, estos tambien pueden ser usados para estudiar la morfología de otros materiales (por ejemplo, las estructuras lamelares de polímeros semicristalinos de las estructuras de dominio de bloques de copolímeros).

TIPOS DE TINCIONES.

Tinción de Gram:

Dividida en gram positivo y gram negativo, en el caso de los gram (+) la muestra fue sarcina, puesto que una tonalidad violeta fijada en su estructura determina la presencia de la misma puesto que fijó en su estructura el cristal violeta.

Y en el gran (-) utilizamos salmonella identificada por la presencia de muchas estructura un poco triangulares de color rojo.

En la muestra de la práctica anterior 3 eran gran positivo por su coloración morada.

Tinción Simple:

Estudia levaduras, en este experimento se usa un solo colorante que fue azul de metileno, donde observamos que las levaduras tenían cocos. Estas células bacterianas difieren desde el punto de vista químico de su medio exterior y por eso se tiñen contrastando con su alrededor.

Tinción de Esporas:

La bacteria es una estructura muy pequeña, sin embargo, por medio de esta tinción pudimos observar la estructura interna de la célula bacteriana, particularmente las endosporas, en este experimento se utiliza una tinción simple debido a que la misma permite que se coloree toda la célula excepto la espora que se observa de un tamaño bien aceptable.